Идентификация вирусов гриппа

Типовую принадлежность вновь выделенных штаммов вируса проводят в РСК с эталонными иммунными сыворотками. Выполнение реакции начинают с титрования гемолитической сыворотки и комплемента. С этой целью в отдельных пробирках готовят разведение гемолитической сыворотки с 1 : 100 до титра, указанного в наставлении по применению, и комплемента в следующих отношениях: 1:10, 1:15, 1 : 20, 1 :25, 1 :30 и т. д.

Затем в других пробирках соединяют их вместе, разливая каждое разведение гемолитической сыворотки по вертикальным рядам в объеме 0,1 мл, а разведения комплемента — по горизонтальным рядам также по 0,1 мл, после чего добавляют к смеси по 0,1 мл 3 % взвеси эритроцитов барана и по 0,2 мл забуференного изотонического раствора хлорида натрия, содержимое пробирок перемешивают. Штатив с пробирками помещают в термостат с температурой 37 °С и выдерживают 1 ч. Контроль специфичности реакции: 1) к 0,1 мл гемолитической сыворотки в разведении 1 : 1000 добавляют 0,1 мл 3 % взвеси эритроцитов и 0,3 мл изотонического раствора хлорида натрия; 2) к 0,1 мл комплемента в разведении 1 : 10 добавляют 0,1 мл взвеси эритроцитов и 0,3 мл изотонического раствора хлорида натрия; 3) к 0,1 мл взвеси эритроцитов добавляют 0,4 мл изотонического раствора хлорида натрия.

При отсутствии гемолиза эритроцитов во всех контрольных пробирках определяют титр гемолитической сыворотки и комплемента. Титром гемолитической сыворотки считают то наибольшее ее разведение, при котором наступает полный гемолиз эритроцитов в присутствии комплемента, разведенного 1 : 10. Для работы гемолитическую сыворотку берут в 3-кратном титре.