Оценка яркости клеток

При люминесцентной микроскопии материалов от больных ОРЗ наиболее легко и часто обнаруживаются клетки с общей специфической иммунофлюоресценцией цитоплазмы, что является свидетельством поздней стадии их тотального вирусного поражения. При ранних стадиях ОРЗ отмечается наличие сравнительно малого числа клеток с яркой иммунофлюоресценцией на фоне общего количества клеток в препарате, имеющих только аутофлюоресценцию; в вируссодержащих клетках наблюдается не только цитоплазменное, но и ядерное специфическое свечение.

Часто видны крупные, слабо светящиеся клетки плоского эпителия, а также лейкоциты, число которых особенно велико при гнойных ринитах. Диагностическое значение имеют только клетки цилиндрического эпителия, имеющие бокаловидную форму, а иногда и реснички в верхней части; клетки плоского эпителия, которые обычно бледно окрашены, и лейкоциты (обычно ярко светящиеся) не учитываются. Внимательно рассматривая клетки цилиндрического эпителия, обращают внимание на участки с повышенной яркостью флюоресценции в цитоплазме и ядрах и решают вопрос об их принадлежности к возбудителям ОРЗ. Яркость флюоресценции пораженных клеток оценивают по условной четырехплюсовой шкале и регистрируют в специальном журнале.

Для постановки диагноза необходимо обнаружить в мазке по меньшей мере 5 клеток цилиндрического эпителия с типичной локализацией флюоресцирующих включений с яркостью свечения не менее 2. При затруднениях с оценкой яркости и специфичности иммунофлюоресцентной окраски препаратов необходимо производить контрольные исследования, используя: а) риноцитологические материалы от заведомо здоровых волонтеров; б) окраску препаратов гетерологичными флюоресцирующими иммуноглобулинами; в) препараты вируссодержащих и контрольных монослойных клеточных культур, выращенных на покровных стеклах. Следует подчеркнуть, что уверенная ИФ-диагностика ОРЗ возможна лишь при периодическом контроле качества юстировки осветительной части люминесцентного микроскопа и наличии некоторого опыта.