Подготовка материала

Концентрацию вирусов из носоглоточных смывов проводят при температуре от 0 до 6°С по следующей методике: к 10 мл смыва добавляют 8 мл 30 % раствора полиэтиленгликоля и 2 мл полиглюкина. Пробирки закрывают резиновыми пробками и тщательно встряхивают, повторяя перемешивание 2—3 раза за 1 ч. Затем пробирки центрифугируют 20 мин при скорости 1500—2000 об/мин. При этом образуется каплевидная донная фаза, представленная декстраном и осажденным вирусом. После удаления надосадочной жидкости донную фазу извлекают с помощью пастеровской пипетки, разводят в небольшом объеме изотонического раствора хлорида натрия (0,4 мл) и используют для заражения куриных эмбрионов. Применение этой методики обеспечивает 30—100-кратную концентрацию вирусов гриппа А и В.

Исследуемые материалы вводят по 0,1 мл в амниотическую полость, затем по 0,2 мл в аллантоисную полость 10-суточных куриных эмбрионов. Заражение проводят в затемненном боксе через боковую поверхность скорлупы, направляя иглу шприца сначала в амниотическую, а затем в аллантоисную полость. Материалом от каждого больного заражают 3 эмбриона. Зараженные эмбрионы инкубируют в термостате 72 ч при 33—34 °С (оптимальные условия для репродукции вирусов гриппа А и В).