спросили:
Постановка реакции РИЭ
Аппаратура, посуда и препараты аналогичны используемым в РТГА. Дополнительно требуются термостат на 37 °С и микротитратор Такачи (для микрометода). В качестве антигенов применяются рекомбинанты вируса гриппа, содержащие актуальную нейраминидазу, антитела к которой необходимо выявить, и гемагглютинины животных, антитела которых в сыворотках людей не содержатся. Исследуемые парные сыворотки людей в объеме 0,1 мл разводят на изотоническом растворе хлорида натрия 1 : 10 и прогревают в водяной бане при 56 °С в течение 30 мин. Во все лунки панелей, кроме 1-го ряда, вносят по 0,1 мл изотонического раствора, затем в 1-й и 2-й ряд по 0,1 мл разведенной 1:10 исследуемой сыворотки. Последнюю со 2-го ряда раститровывают до конца панели, получая разведение с 1:10 до 1 : 320. В каждую лунку добавляют по 0,1 мл 4 АЕ антигена; контакт реагентов осуществляется при комнатной температуре 1 ч. После контакта во все лунки вносят по 0,2 мл 1 % взвеси эритроцитов кур, приготовленной на изотоническом растворе хлорида натрия.
Панели оставляют при комнатной температуре на 1 ч для образования агглютината при взаимодействии эритроцитов и гемагглютинина животного происхождения, присутствующего в рекомбинантном вирусе. После этого панели переносят во влажную камеру или обертывают влажной тканью, затем полиэтиленовой пленкой и инкубируют в термостате при 37 °С 16 ч.