спросили:
Постановка реакции РТГА
Для постановки реакции РТГА в пробирки наливают 10 % взвесь стафилококков из расчета 0,1 мл на 0,2 мл сыворотки. Пробирки со взвесью стафилококков центрифугируют в течение 5 мин при 2000 об/мин, надосадочную жидкость сливают. К осадку добавляют разведенные 1 : 10 сыворотки в необходимом объеме (0,2 мл сыворотки на 0,1 мл взвеси стафилококков, взятой до центрифугирования). Исследуемый материал можно смешивать из расчета 0,5 мл сыворотки, разведенной 1 : 5, с осадком, полученным после центрифугирования 2 мл 10 % суспензии стафилококка.
Пробирки с осадком и сыворотками несколько раз сильно встряхивают и оставляют при комнатной температуре на 30 мин. В течение этого времени встряхивание пробирок повторяют 3—4 раза. Затем стафилококк из смеси осаждают центрифугированием в течение 20 мин при 2500—3000 об/мин, надосадочную жидкость из пробирок переносят в лунки панелей по 0,2 мл для каждого антигена) и проводят дальнейшее разведение сывороток. Параллельно титруют необработанные сыворотки. Результаты РТГА оценивают по разнице титров антител в необработанных и обработанных сыворотках. 4-кратное и более снижение титра антител в сыворотках, обработанных взвесью стафилококка, свидетельствует о присутствии IgG-антител.