Титрование комплемента

Титрование производят с целью определения дозы комплемента, в которой его применяют в РСК.. В связи с тем, что антигены могут обладать остаточными антикомплементарными свойствами, необходимо титровать комплемент в присутствии антигена и определять дозу комплемента отдельно для каждого антигена. Для этого готовят вспомогательный ряд разведений комплемента от 1:11 до 1 : 100 по приведенной ниже схеме. Для титрования комплемента в 2 горизонтальных ряда полистироловой панели (по 12 лунок) вносят по 1 капле рабочего разведения антигена.

В 2 нижних ряда вместо антигенов вносят по 1 капле буфера. Затем по вертикальным  рядам  добавляют по 2   капли   соответствующего   разведения комплемента, начиная с максимального. Панели складывают одна на другую и закрывают сверху пустой панелью. Под панели подкладывают влажную марлевую салфетку и всю стопку заворачивают в полиэтиленовую пленку, после чего выдерживают 18 ч при 4 °С. Затем панели вынимают из холодильника, оставляют при комнатной температуре на 10—15 мин и в каждую лунку добавляют по 2 капли свежеприготовленной гемолитической системы.